环氧乙烷灭菌
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环氧乙烷灭菌器的安装要求: 环氧乙烷灭菌器必须安放在通风良好的地方,切勿将它置于接近火源的地方。为方便维修及定期保养,环氧乙烷灭菌器各侧(包括上方)应预留51cm空间。应安装专门的排气管道,且与大楼其它排气管道隔离。
环氧乙烷灭菌——灭菌器试验器材:
(1) 枯草杆菌黑色变种( ATCC 9372 )芽孢菌片。
含菌量要求为5 ×10cfu/片~5 × 10cfu/片(按活菌培养计数结果计)。在环氧乙烷量为600mg/L±30mg/L,温度为℃±2℃,相对湿度为60%±10% 条件下,菌片上芽孢存活时间应≥7.8min,杀灭时间≤58min,D值为2.6min~5.8min。
(2) 染菌载体( 10 × 10 ,以布片为代表,必要时可随灭菌对象,增用或改用其他载体。
(3) 聚乙烯塑料袋( 封装菌片用,大小为60× 40 ,厚0.2~0.4 )。
(4) 活菌培养计数所需器材(见2.1.1.3 )。
(5) 使用说明书中规定灭菌器可处理的物品(装填灭菌器,使达满载要求)。
环氧乙烷灭菌——灭菌器操作程序:
(1) 根据试验要求,制备枯草杆菌黑色变种芽孢悬液和菌片。菌片放入双层聚乙烯塑料袋内密封包装,每袋2片。每次试验用20袋。
(2) 将灭菌器上、中、下3层,每层内、中、外各设一点,共设9点。每点物品中间布放1袋,共需18袋试验菌片。另将一袋(2片)菌片放置在室温条件下作为阳性对照。
(3) 按使用说明书所规定的环氧乙烷浓度、作用时间、柜内的温度和相对湿度,在满载条件下进行环氧乙烷灭菌处理。满载用物品,随灭菌器用途而定。处理完毕,取出菌片,分别移种于5 营养肉汤培养基中,置37℃ 培养箱内培养,7d后观察终结果(定性培养检测)。
对难以判断结果的营养肉汤管,取其中0.2悬液接种营养琼脂平板,用无菌L棒涂抹均匀,置37℃ 培养箱内培养。48h后涂片染色,显微镜下观察菌落形态,或进一步做其他试验,判断有无生长或生长的是否为试验菌。若为非试验菌,则应重新进行试验。
(4) 测试中,应同时设立定性和定量阳性对照组与阴性对照组。
(5) 定量阳性对照组,以同批试验用菌片置室温下,待消毒或灭菌试验组达规定作用时间后,立即将该菌片2片分别放入含5.0mlPBS中,各振敲打80次。取洗液按2.1.1.3 所示方法进行活菌培养计数。
(6) 定性阳性对照组,以同批试验用菌片置室温下,待灭菌试验组达规定作用时间后,立即将该菌片2 片,分别接种于5.0 营养肉汤培养基,放入温箱中作定性培养,观察有生长情况。
(7) 阴性对照组,以同批次试验用未染菌样片2 片,分别接种于5.0 营养肉汤培养基,同时将未接种过的营养肉汤培养基放入培养箱中作定性培养,观察有无生长。
(8) 试验重复5 次。
(9)在5次试验中,每次试验中的阳性对照菌片,回收菌量均应在5×10cfu/片~5×10cfu/片;定性阳性对照组,生长良好;阴性对照应无菌生长。阳性或阴性对照若有不符合上述要求的结果,试验作废,重新进行。
环氧乙烷灭菌优点是:
1、能杀灭所有微生物,包括芽孢。
2、灭菌物品可以被包裹、整体封装,可保持使用前呈无菌状态。
3、相对而言,EO不腐蚀塑料、金属和橡胶,不会使物品发生变黄变脆。
4、能穿透形态不规则物品并灭菌。5 可用于那些不能用消毒剂浸泡,干热、压力、蒸汽及其他化学气体灭菌之物品的灭菌。
环氧乙烷灭菌——灭菌器注意事项:
(1) 温度和相对湿度对环氧乙烷气体杀菌效果影响较大,故应严格控制试验中的有关条件。
(2) 环氧乙烷液体可溶解聚乙烯、聚氯乙烯等,不可将其液体滴落于此类物品上。环氧乙烷不论液体或气体,均可损坏赛璐璐制品,试验时应予注意。
(3) 环氧乙烷易燃易爆,操作现场应采取防火防爆措施,不得有明火作业及电火花发生。
(4)吸入过多环氧乙烷气体,可引起,呕吐等中毒,严重者可致肺水肿等。工作环境中应有良好的通风。在每日8h 工作中,环氧乙烷浓度应不过1.82mg/m3 (1ppm),15min 工作中暴露浓度不过9.1mg/m3(5.0ppm)。如出现中毒,需迅速离开现场。轻者呼吸新鲜空气,直到消除;重者应及时送。
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